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山口大学开发纳米套装CLEM法

山口大学共同獣医学部臨床獣医学講座的角川博哉教授与滨松医科大学光医学综合研究所的河崎秀阳准教授所率领的联合研究团队,...
山口大学共同獣医学部臨床獣医学講座的角川博哉教授与滨松医科大学光医学综合研究所的河崎秀阳准教授所率领的联合研究团队,成功开发出一种名为“纳米套装CLEM法”的全新实验技术。该方法无需对样本进行前干燥处理,即可直接利用冷冻切片实现光电关联显微技术(Correlative Light and Electron Microscopy, CLEM)的观察。

光电关联显微技术是一种结合光学显微镜与电子显微镜进行联合观测的方法,以往必须对样本进行前干燥处理。本研究通过采用更易操作的冷冻切片,不仅减轻了样本在制备过程中的损伤,还拓展了其与多种抗体等标记物结合应用的潜力,为多样化的生物分析开辟了新途径。

电子显微镜虽能实现超高分辨率成像,但其观测视野极为有限。CLEM技术是目前克服这一局限的唯一手段,可在光学显微镜定位目标结构后,进一步利用电子显微镜对其内部构造进行精细观测。新开发的“纳米套装CLEM法”无需前干燥步骤,可直接观察冷冻切片,从而更好地保留生物样本的天然结构,使得细胞核、线粒体等细胞器,以及细胞内寄生菌、病毒甚至生物分子的分布与状态得以在高分辨率下清晰呈现。

在实际应用中,研究团队以体重超过700公斤的牛只垂体前叶冷冻切片为样本,成功通过电子显微镜拍摄到仅占整体12%的促黄体生成素分泌细胞内的分泌颗粒等超微结构,展示了该方法在大型动物组织研究中的适用性。

未来展望:
由于该方法无需前干燥处理、仅使用冷冻切片的简便操作特性,以及适用于大型动物样本的优势,预计将在生命科学领域发挥重要作用,并进一步拓展至理学、农学、工学、兽医学及医学等多个学科。除了推动基础研究的深入,该技术也有望广泛应用于临床医疗及企业研发场景,为超微结构解析提供有力的技术支撑。